大多数下一代测序(NGS)文库构建工作流程包括一个或多个PCR扩增步骤,以添加功能元素(例如,样品指数、分子条形码或流细胞寡核苷酸结合位点),富集测序合格的DNA片段和/或生成足够数量的文库材料用于下游处理。PCR还应用于NGS工作流程中的其他目的。无论何时进行PCR,都必须谨慎选择适当的酶和协议参数,以确保高效率,最大限度地减少扩增偏差和限制序列伪影的引入。
罗氏测序解决方案提供KAPA HiFi DNA聚合酶的KAPA HiFi试剂盒家族,使用定向进化技术工程。KAPA HiFi酶通过为NGS和PCR应用提供高效、低偏倚的DNA和cDNA扩增,有助于提高整体测序质量和经济。这转化为对困难区域的更统一的覆盖和更低的重复率,使研究人员可以释放他们样本的潜力。此外,KAPA HiFi家族包括KAPA HiFi尿嘧啶+试剂盒,其中包含一种尿嘧啶耐受性变体,KAPA HiFi尿嘧啶+ DNA聚合酶。这种酶仍然具有KAPA HiFi所具有的同样的优点,但也能耐受修饰核酸的扩增,包括亚硫酸氢盐转化的DNA。
这些试剂盒含有耐尿嘧啶的KAPA HiFi尿嘧啶+ DNA聚合酶,以现成的混合形式;并将KAPA HiFi酶的所有好处都赋予了修饰核酸的扩增,特别是亚硫酸氢盐转化的DNA。
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