KAPA hgDNA定量和质控试剂盒

KAPA hgDNA定量和QC试剂盒包含在NGS文库建设之前，基于qpcr的人类基因组DNA样本定量和质量评估所需的所有消耗品。每个包包含KAPA SYBR快qPCR主混合，优化高性能SYBR绿色i基qPCR通过我们的定向进化技术这是一套预先稀释的DNA标准物和引物预混物，针对高度保守的单拷贝人类基因座的不同部分。绝对定量是通过引物对定义最短的片段和附加引物提供关于DNA样本中可扩增模板数量的信息来实现的。用该试剂盒生成的质量分数(或q -ratio)可用于预测文库建设的结果或为不同质量的样本定制工作流程，特别是FFPE DNA。

• 单次测定定量和质量评价
  
• 能够将质量评分与排序指标相关联
• 一个通用的、易于自动化的工作流

首先，使用三种不同的引物对，在一个保守的单拷贝人类位点中扩增41 bp、129 bp或305 bp的目标，使用一套DNA标准集生成最多三条标准曲线。接下来，41 bp法用于DNA样本的绝对定量。为了评估DNA质量，生成标准曲线，并使用129 bp和/或305 bp引物预混料(es)对样品进行分析。由于较差的DNA质量对较长的靶标扩增有较大的影响，可以通过将129 bp或305 bp测定法得到的浓度与41 bp测定法得到的浓度归一化来推断DNA样本的相对质量。这种归一化产生了一个q比(值在0到1之间)，它表示DNA质量，或DNA样本中可扩增物质的数量。